果冻制作厂911制片厂麻花

老师

程翱（徒弟）

凌祎丽（师父）

时间

2021年4月7日

2021年4月8日

班级

高二5班

高二4班

老师

程翱

时间

2021年4月7日

班级

高二5班

教学目标

1举例说出动物细胞融合与单克隆抗体技术及应用

2概述单克隆抗体的制备过程，以及过程中涉及的具体筛选过程

3阐明单克隆抗体的应用，和普通抗体相比的优点

4举例说明从生物导弹的应用了解单克隆抗体目前在抗癌方面的贡献，并努力掌握更多的相关知识

教学设计

播放视频：“浆”爱传递，我们都是抗疫英雄

为什么血浆能够拯救危重病人，血浆里有什么物质？

Q1：什么免疫方式可以产生抗体？

Q2：抗体是由什么细胞分泌的？

Q3：初次免疫时，浆细胞是由什么细胞增殖分化而来？

Q4：抗体的化学本质是？

想一想：你认为这种方法好不好？

①血浆中抗体少。②纯度不高。③特异性差。

康复者捐献的血浆是有限的，也有缺点。

资料1：动物在免疫反应的过程中，体内产生的特异性抗体种类多达百万以上，但是每一个效应B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。

资料2：体外条件下，效应B淋巴细胞一般不再有丝分裂。

想一想：要想得到更多的抗体，你有什么想法？

想一想：什么细胞能够在体外进行有丝分裂？

想一想：如果你是科学家，你会怎么做？怎样使一个新细胞拥有这两种细胞的特性？

资料4：米尔斯坦和科勒设计了方案：利用动物细胞融合技术融合形成杂交瘤细胞——既能产生特异性抗体又能大量繁殖的细胞。

一、动物细胞融合

也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。

对比植物体细胞杂交学习动物细胞融合的过程。

想一想：动物细胞融合时，取许多浆细胞与许多骨髓瘤细胞融合，仅考虑2个细胞之间的融合，培养液中会有多少种细胞类型？哪一种是我们需要的？浆细胞-骨髓瘤细胞。

想一想：接下来要怎么办？

二、单克隆抗体的制备

第一次筛选获得杂交瘤细胞：

①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。

②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。

③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。

动一动：设计一种方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞的方法。

选择性培养基（培养基中加入氨基嘌呤），收集杂交瘤细胞。

经过筛选后的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞（很多种杂交瘤细胞），需要在多孔培养板上分开进行专一抗体阳性检测和克隆化培养，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

想一想：要想得到能产生特异性抗体的细胞，必须保证多孔培养板里每个孔有几个细胞？

想一想：怎么做才能让每个孔里只有1个细胞？

第二次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

想一想：如何检测哪一种是需要的特异性抗体？

想一想：如何获得大量的抗体？

资料5：目前已开发的针对新冠病毒的单克隆抗体可以靶向S蛋白，阻断S蛋白与受体的结合，并干扰新冠病毒进入宿主细胞。

单克隆抗体特点：

特异性强、灵敏度高、并可大量制备

叁、单克隆抗体的应用

1.作为诊断试剂

在受精后不久，胚盘滋养层细胞会分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），在孕妇的尿液中大量存在，而非妊娠妇女尿液中几乎不含有。用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”第8天就可以做出诊断。

利用同位素标记的单克隆抗体，在特定的组织中成像的技术，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。

2.用于治疗疾病和运载药物

四、延伸

除了动物细胞融合的方式，还有没有其他方法得到单克隆抗体？

科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因（prG）。

①基因工程

②核移植

主题

免疫调节

老师

凌祎丽

时间

2021年4月8日

班级

高二4班

教学目标

1举例说出动物细胞融合与单克隆抗体技术及应用

2概述单克隆抗体的制备过程，以及过程中涉及的具体筛选过程

3阐明单克隆抗体的应用，和普通抗体相比的优点

4举例说明从生物导弹的应用了解单克隆抗体目前在抗癌方面的贡献，并努力掌握更多的相关知识

教学设计

一、导入

播放视频：众志成城，抗击疫情

新冠病毒，这种不人所了解的病毒，在短时间内迅速蔓延，包括医务人员在内的多名患者死亡，引起社会恐慌。

大家为什么这么害怕新冠病毒，普通感冒为什么不那么害怕？对于这样的危重病人，有什么救命的办法吗？

二、单克隆抗体的制备

（一）制备原理

1.抗体是什么？有何作用？

2.一种浆细胞能产生几种抗体？为什么？

一种B细胞能识别单一的一种抗原，接受刺激，进而增殖分化为特定的浆细胞，产生专一抗体与抗原结合，阻止其繁殖。

3.从患者血清中直接分离出的抗体，效果不够理想，为什么？

从出生开始，每接触一种抗原，体内就会产生一种浆细胞和一种相应的抗体，积累到现在，十几年过去了，体内至少有上百万种抗体，并且每种抗体结构都极其相似，只有可变区有微小差别，所以提取单一抗体特别困难，一起使用效果又不好，所以提出的抗体具有产量低，纯度低，特异性差等缺点。

4.如何才能获得单一种类的抗体呢？

5.浆细胞体外培养最多能传多少代？如何让其无限增殖呢？请小组讨论探究浆细胞无限增殖的办法，限时两分钟。

叁种办法里细胞融合相对较简单。直接从小鼠体内难以分离出特定的浆细胞，且融合成功率低，应该怎么办？

先融合，等细胞数目足够多时，再筛选。

那么我们应该选择哪种生物的癌细胞呢？众多癌细胞里选择谁最合适呢？为什么？

我们把浆细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，那么这个细胞就同时具有了双亲的性状，既可无限增殖又可产生特异性抗体。

（二）单克隆抗体制备过程

1.如何得到浆细胞？

2.从什么器官分离浆细胞？

大家一起来回顾一下人体有哪些免疫器官？来我们一起说一遍。

这么多免疫器官我们从哪里选呢？

3.分离出得浆细胞是一种吗？

有了浆细胞，还需要骨髓瘤细胞，动物细胞培养就好了，那么下一步就是融合了，融合得方法是什么呢？

4.融合之后得细胞是单一种类吗？有哪些类型呢？

到这里为止就是单抗制备得第一步，即融合。

5.众多杂交细胞当中我们想要得是哪一种呢？我们要杂交瘤细胞，所以下一步我们需要筛选。我们一般用选择培养基筛选，这个选择培养基应该是只能让杂交瘤细胞生长，其他得融合细胞和为融合细胞应该都不能生长。老师给大家提供一些信息，请同学们自主设计选择培养基。信息如下：骨髓瘤细胞DNA复制途径只有甲途径，B细胞DNA复制途径有甲和乙两条，且甲途径可以被某种氨基酸阻断，请同学们以此设计选择性培养基

6.筛选出来的细胞是单一种类吗？有没有我们想要得那种呢？怎么确定有没有呢？用什么办法呢？请大家小组讨论。

7.如果出现阳性反应了，说明有我们想要的细胞，但是数目多还是少呢？能不能现在就提取呢？有什么顾虑？那我们应该怎么办呢？

我们就先培养它，等它数目多了再分离，在培养过程中，我们仍然需要进行专一抗体检验阳性，以确认我们要的杂交瘤细胞传了下来。

8.检测之后发现我们的细胞还在，可是大家混在一块，你怎么知道哪个是我们想要的呢？请大家想个办法吧。

到此为止，就是单抗制备的第二步，就筛选，一筛筛出杂交瘤细胞，二筛筛出我们想要的产生特定抗体的杂交瘤细胞

得到了我们想要的细胞了，下一步就是生产，有几种方法？分别从哪里提取抗体？

此为第叁步，生产，体外生产和体内生产。

综上我们可以总结单抗生产的叁大步：融合----筛选-----生产

9.都涉及了什么技术呢？动物细胞融合和动物细胞培养。

下面我们就一起观看单克隆抗体制备过程视频。

（叁）单克隆抗体概念

下面请同学们根据单抗的制备过程，总结什么是单克隆抗体？这五个字该怎么理解呢?  

所以单克隆抗体就是单一的B淋巴细胞经过复制形成的细胞群产生的化学性质单一的抗体。

（四）单克隆抗体应用

那么单抗有什么优点呢？有哪些应用呢？请大家阅读教材回答问题

拓展：简单介绍市面上几种单抗的应用以及生产研发前

（五）课堂小结、习题

总结单克隆抗体的制备过程

通过习题，检验学生的掌握情况